martie 11, 2021

Mai întâi rezultă caracteristicile calitative și activitatea biologică a extractelor nematocite din CHRSAORA PLOCAMIA (CNIDARY, SCYPHOZOA)

Lat. Am. J. AQUAT. Res., 36 (1): 83-86, 2008
DOI: 10.3856 / vol36-ISSUEL-FULTEXT-6

Comunicare scurtă

Primele rezultate pe caracteristicile calitative și biologice Activitatea extractelor nematociste din crysoraora PLOCAMIA (CNIDARY, SCYPHOZOA)

Primele rezultate privind caracteristicile calitative și activitatea biologică a extractelor nematociciestice de cruciaora plocamia (CNIDARY, SCYPHOZOA)

Marco A. Vega & Juan P. Ogalde

Departamentul de Științe de bază, Universidad Santo Tomás Heroes din Concepción 2885, Iquique, Chile.

Adresa pentru corespondență

Rezumat. Noi interpretarea caracterizărilor calitative și cantitative ale activității biologice a extractelor nematociste din 30 de exemplare de Chrysaora Pocamia colectate de pe Huayquique, Iquique, Chile. După extragerea nematocizilor din tentaculele de meduze, le-am caracterizat cu UV și IR și le-am determinat activitatea biologică prin analiza antioxidantă și hemolitică. Rezultatele preliminare sugerează că molecululul extras este aminoacizi originari din proteine, cu activitate antiadicary de aproximativ 65% ca parts cu un antioxidant de origine comercială și activitate hemolitică foarte scăzută.

Cuvinte cheie: meduze, nematocyst, bioactivitate. , Antioxidant, hemoliză.

Rezumat. Se caracterizează calitativ și cantitativ activitatea biologică a extractelor nematocitelor de 30 de exemplare ale lui Chrysaora Pocamia colectate din orașul Huayquique, Iquique, Chile. Un extract nematocystic a fost obținut din brațele meduzei și a fost caracterizat printr-o mișcare în intervalul ultraviolet și infraroșu și apoi activitatea sa biologică a fost determinată de analiza antioxidantă și hemolitică. Rezultatele obținute sugerează că moleculele extractului ar putea fi aminoacizii din proteine, cu activitate anti-radicală, aproximativ 65% comparativ cu un antioxidant de origine comercială și o activitate hemolitică destul de scăzută.

Cuvinte cheie: Jellyfish, Nematocyst, Bioactivitate, Antioxidant, Hemoliză.

CHRYSAORANPOCAMIA (Lecția, 1830) este una dintre cele 14 meduze scifozoare care locuiesc în apele chiliene (Siefeld, 2002). Această specie este distribuită în Oceanul Pacific de Sud din Paița de pe Peru de Nord spre Punta Arenas în afara Southern Chile (Lecția, 1830, Vanhoffen, 1888Ykfe Kramp, 1961). Au fost găsite cantități masive de meduze moarte sau de rămășițe ale acestora spălate pe țărm în Iquique, special în timpul verii și o parte a primăverii; Nematocyștii că utilizarea meduzei pentru hrănire și apărare sunt una dintre cele mai frecvente cauze ale iritațiilor pielii din înotătorii (Vera et al, 2005). Această specie nu este toxică și cauzelor nici otrăvire moderată, nici severă la om, spre deosebire de Fixiafysalis, o altă specie a raportat în apele chidene ale căror toxine produce complicații sistemice severe (Vera et al, 2005). Cu toate acestea, veninul ușor toxic al C. Plocamia poate provoca manifestări ușoare și oftalmologice în primele 24 de ore și întârzierea pe termen lung reacționează la persoanele care au fost sensibilizate prin contactele anterioare care au ca rezultat un răspuns imun (Vera et al, 2005 )

Deși observat frecvent în zonele de coastă, există puține informații despre biologia compamiei și chiar mai puțin despre nematocystiturile sale și despre purificarea, compoziția și mecanismele de acțiune ale veninului său, așa cum este disponibil pentru Alte specii congeneriare, cum ar fi C. Quin-Quecirrha sau C. Achyos (Long-Rowe id = „B1898190B1”> Burnett, 1994, Faisal et al, 1999, Takatoki și colab., 2004). Prin urmare, am efectuat o caracterizare calitativă preliminară pentru a măsura activitatea biologică a extractelor nematociste de 30 de exemplare C. Plocamia colectate de pe Huayquique, Iquique, în saci de plastic cu scufundări la o adâncime maximă de 35 m în ianuarie și februarie 2007. Fiecare specimen A fost identificată la nivelul speciilor conform KRAMP (1961) și Fagetti (1973), iar diametrul exterior al clopotului a fost măsurat.

mai târziu, pe baza tehnicii modificate a lui Burnett și colab. (1992) și Burnett & Goldner (1970), tentaculele de meduze au fost extrase și înmuiate pe filtru de 0,5 mm. Extractul rezultat a fost refrigerat în flacoanele de 25 ml marcate în containere până la analiza lor în laboratorul de științe de bază al Universității Santo Tomás, Iquique Campus. Fiecare probă a fost apoi centrifugată la 4000 rpm timp de 2 minute într-o centrifugă Hettich (Boeco-28, Rotor 1624) într-o probă 2: 3 ml: soluție de zaharoză saturată; Decăderea rezultată a fost re-centrifugată timp de 1 min. Eșantionul a fost apoi supus la agitare magnetică rece (Velp Stiintimi) timp de 15-20 minute la 1200 rpm până la obținerea extractului nematocist.Randamentul și diafragma extractului nematocyst au fost estimate prin numărarea la 0,2 ml sub microscop ușor. Pentru a caracteriza calitativ extractul nematocist în zaharoză în ceea ce privește aminoacizii și peptidele, o curățare UV de 250-700 nm a fost efectuată într-un spectrofotometru Shimadzu UV-Vis 1240 folosind un semifabricat cu apă distilată și un control cu o soluție saturată de zaharoză și o maturare IR de 700-4000 nm, cu un semi de zaharoză cu apă distilată. Prezența proteinelor a fost confirmată calitativ în extractul nematocist prin supunerea acestuia la un test de biuret.

După aceea, a fost testată activitatea biologică a extractului, evaluând activitatea de captare a radicalilor prin intermediul unui test DPPH (difenilpicilhidrazil , Abuin și colab., 2002) în triplicat. Pentru aceasta, 1 ml de extract s-au adăugat la 2 ml de soluție DPPH (10 mg DPPH (99%) în 1 I de metanol, DPH 10G-L-1), care a fost mai târziu incubat într-o baie termoreglată timp de 30 de minute . Absorbția sa a fost apoi citită la 517 nm prin utilizarea unui martor cu metanol. Activitatea antioxidantă a extractului a fost calculată după cum urmează: a = 100 (1-ABS de probă / ABS) (Burda et al, 2001). Această activitate a fost comparată cu BHT (hidroxitoluen butilat), un antioxidant comercial utilizat frecvent în industria alimentară.

Activitatea hemolitică a extractului a fost, de asemenea, dovedită utilizând testul de hemoliză cu eritrocite umane conform lui Zou și colab. (2001) și Mayasuki și colab. (1987). Pentru aceasta, au fost plasate 5 ml de sânge preluați de la un donator tânăr, sănătos, care au fost postați timp de 12 ore au fost plasați într-un destinatar cu agentul anti-coagulare EDTA. Plasma a fost eliminată în trei exemplare prin centrifugarea probei (3500 rpm timp de 5 minute) și suspensia de eritrocit a fost spălată cu soluție salină fiziologică (0,9%) pentru a elimina reziduul de plasmă. În cele din urmă, s-au adăugat 1 ml de suspensie originală (5 ml de eritrocite spălate măsurate la 250 ml cu soluție salină fiziologică 0,9% la diferitele volume ale extractului până la atingerea a 3 ml cu salina fiziologică. Apoi, acestea au fost incubate la 37 ° C într-o baie termoreglată timp de 2 ore, centrifugată la 3500 rpm timp de 5 min, iar supernatantul a fost cuantificat la 541 nm.

Toate specimenele eșantionate au fost vii și mature. Diametrele clopotului au fluctuat între 130 și 250 mm. Randamentul extractului nematocist pe specimen a variat de la 75 la 85%, în timp ce randamentul de ruptură nematocyst a variat de la 50 la 70% la fiecare 0,2 ml.

în ceea ce privește spectrul de gama UV, a fost observat un vârf mic la 280 nm împreună cu o serie de analiți care au absorbit între 350 și 700 nm (figura 1). Suprafețele IR ale extractelor au evidențiat semnale ale benzilor cele mai „concentrate” ale extractului din grupa 1 (2800-3000 nm), asociabile cu uniunile O-metil sau grupurile O de formare a aldehidă; Grupa 2 (1500-1200 nm) legată de obligațiunile N02, 0-N02 și C-N02; Grupa 3 (1200-1000 nm) asociată cu legăturile C-O, C-Oh și C-N, în care cea mai probabilă este legătura C-O, dar există probabilități medii pentru legăturile C-N; și grupul 4 (1000-700 nm) legat de legăturile C-O, O-O, N-O și N02, în care cel mai probabil este C-O (figura 2).

div id = „e8c3a7c856”

Procentul activității de capturare a radicalilor liberi (fig.3) a indicat o activitate antiradicativă a extractului nematocist de aproximativ 65% în comparație cu un antioxidant comercial utilizat în industria alimentară (BHT), a cărui activitate este mult mai eficientă ( 97%). Pe de altă parte, extractul nematocist a prezentat o activitate hemolitică scăzută în eritrocitele umane (figura 4).

„10E2F30CF5”>

div id = „62ae73a7f3”

Extractul a prezentat o legătură de CO în structurile sale care ar fi putut fi o grupare aldehidă sau carbonil și o legătură NC, azot care poate fi asociată cu o grupare nitro. Aceste molecule (oxigenate și / sau nitrogenate) dau rezultate pozitive în testul Buriet pentru proteine, corespunzând vârfului de 280 nm în viteza UV. Acest lucru sugerează că moleculele extractului ar putea fi aminoacizi din proteine. Prezența unei componente proteice este observată și la speciile cu un potențial toxic mai mare (Vera et al, 2004, 2005). Pe de altă parte, gama de analiți absorbiți între 350 și 700 nm sugerează un efect al concentrației de zaharoză, având în vedere absorbția mai mare a extractului.

Având în vedere activitatea antioxidantă a extractului, poate fi dedusă Acest lucru se datorează probabil prezenței proteinelor care conțin grupări aromatice. Prezența unei componente proteice este de asemenea observată la speciile cu un potențial toxic mai mare (Vera et al, 2004).

Activitatea hemolitică a toxinei a fost dovedită în alte specii cogenerice (C. Quinquecirrha și C. Achlyos) și a fost letală și / sau foarte sensibilă la șobolani. Potențialul său sa dovedit a fi diferit atunci când se compară toxina din ambele specii, fiind mai mică pentru C. Achyos (Long-Rowe id = „B1898190B1”> Burnett, 1994; Faisal et al, 1999).Această specie a fost de asemenea găsită a fi letală în alte țesuturi ale Kilifish Diamond (Atinia Xenica) (Takatoki și colab., 2004). Cu toate acestea, pentru C. plocamia, componentele moleculare testate în extractul nematocist prezintă o activitate hemolitică scăzută, aproape nulă. Prin urmare, putem concluziona că au toxicitate scăzută, cel puțin în eritrocitele umane. Acest lucru ar putea, în general, să explice efectul scăzut cutanat și dermatologic în comparație cu alte specii (Vera et al., 2005). În ciuda acestor rezultate, este necesar să se efectueze noi studii moleculare pentru a determina structura proteinelor prezente în extractul nematocist, pentru a testa hemo-liza în alte specii și pentru a determina aplicațiile antioxidante viitoare ale extractului.

Autorii mulțumesc directorului postgrado (Consiliul de Cercetare și Postuniversitatea) al Universității Santo Tomás pentru finanțarea acestei cercetări.

abuin, E. , E. Lissi, P. Ortiz & C. Henriquez. 2002. Reacția acidului uric cu radicalii DPPH la interfața micelară. Bol. Soc. Chil. Quím., 47 (2): 145-149.

Burda, S., W. Oleszek & J. Agric. 2001. Antioxidant Activități antiradicale de flavonoide. Food Chem., 49: 2774-2779.

burnett, j.w. & r. goldner. 1970. Purificarea parțială a nemematocitului nematocist de nemematocist parțial. Proc. Soc. Exo. Biol. Med., 133: 978-981.

Burnett, J.W., K. Long & h.m. Rubinstein. 1992. Pregătirea plajelor de meduze nematocyst tentacule. Toxicon, 30 (7): 794-796.

Fagetti, E. 1973. Medusas de Aguas Chilenas. Rev. Biol. Mar., Valparaiso, 15 (1): 31-75.

Faisal, R, LA. Gershwin & j.w. Burnett. 2000. Studii toxinologice asupra veninului nematocist al lui Chrysaora Achlyos. Toxicon, 38 (11): 1581-1591.

kramp, p. 1961. Sinopsisul medusae al lumii. J. Mar. Biol. Asociere. U.K., 40: 1-469.

Long-Rowe, K.O. & j.w. Burnett. 1994. Rețeaua de mare (chrysaora chinqucirrrh) Factorul letal: purificarea prin reciclare pe margele acrilice acidului m-aminofenil boronic. Toxicon, 32 (4): 467-478.

Mayasuki, M., T. Hiroshi, M. Makoto, Yorihiro & N. Etsuo. 1987. Oxidarea lanțului radical liber al celulelor roșii roșii de șobolan prin oxigen molecular și inhibarea acestuia de Alfa-Tocoferol. Arc. Biochem. Biophys., 258: 373-380.

Siefelld, W. 2002. Phylum Coelensterata: CLASE SCYPHOZOA. Guías de Identificación Y BiodiversIdad Fauna Chilena. APUNTES de Zoología, Universidad Arturo Prat, Iquique, Chile, 4 pp.

Takatoshi, I., i. Vucenik, a. Shamsuddin, F. Niculescu & j.w. Burnett. 2004. Două noi acțiuni ale nemetelor nematociste de urzică (Chrysaora Quinqucirrrha): studii privind mecanismul acțiunilor asupra activării complementului și asupra sistemului nervos central. Toxicon, 44 (8): 895-899.

Vera, C.K., M. Kolbach, M.S. Zegpi, F. Vera & J.R LONZA. 2004. Picaduras de Medusas: Actualización. Rev. Méd. Chile, 132: 233-241.

Vera, C.K., M. Kolbach, M.S. Zegpi, F. Vera & J.R LONZA. 2005. Medusas en Chile: un Propósito de un Caso. Rev. Chil. Dermatol., 21 (2): 96-101.

zou, C. G., S.A. Nihal & l.J. Graham. 2001. Insultă oxidativă a celulelor roșii roșii umane indusă de inițiatorul radical liber AAPH și inhibarea acestuia de un amestec antioxidant comercial. Viața Sci., 69: 75-86.

primite: 10 iulie 2007; Acceptat: 16 octombrie 2007.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *