mars 11, 2021

Premiers résultats sur les caractéristiques qualitatives et l’activité biologique des extraits de nématocytes de chrysaora plocamia (cnidaire, scyphozoa)

lat. Am. J. Aquat. Res., 36 (1): 83-86, 2008
DOI: 10.3856 / VOL36-ISUEL-FULTEXT-6

Communication courte

Premiers résultats sur des caractéristiques qualitatives et biologique Activité des extraits de nématocystes de la chrysaora plocamia (cnidaire, scyphozoa)

Premiers résultats sur les caractéristiques qualitatives et l’activité biologique des extraits nématocystiques de chrysaora plocamia (cnidaire, scyphozoa)

Marco A. Vega & Juan P. Ogalde

Département des sciences de base, Universidad Santo Tomás héros de Concepción 2885, Iquique, Chili.

Adresse de la correspondance

Résumé. Nous interprètes des caractérisations qualitatives et quantitatives de l’activité biologique des extraits de nématocystes de 30 spécimens de chrysaora plocamia recueillis de Huayquique, Iquique, Chili. Après avoir extrait les nématocystes des tentacules de méduses, nous les avons caractérisés avec des balayages UV et IR et déterminé leur activité biologique par l’analyse antioxydante et hémolytique. Les résultats préliminaires suggèrent que les acides moléculaires extraits sont des acides aminés originaires de protéines, avec une activité antidédique d’environ 65% en partageant un antioxydant d’origines commerciales et une activité hémolytique très faible.

Mots-clés: méduse, nématocyste, bioaactivité , Antioxydant, hémolyse.

résumé. Il se caractérise qualitativement et quantitativement l’activité biologique des extraits de nématocytes de 30 exemplaires de chrysaora plocamia recueillis dans la ville de Huayquique, Iquique, Chili. Un extrait nématocystique a été obtenu à partir des bras de la méduse et s’est caractérisé par un balayage dans la plage ultraviolette et infrarouge, puis son activité biologique a été déterminée par l’analyse antioxydante et hémolytique. Les résultats obtenus suggèrent que les molécules de l’extrait pourraient être des acides aminés à partir de protéines, avec une activité anti-radicale, environ 65% par rapport à un antioxydant d’origine commerciale et une activité hémolytique plutôt faible.

Mots-clés: Jellyfish, nématocyste, bioactivité, antioxydant, hémolyse.

Chrysaoraplocamia (leçon, 1830) est l’une des 14 jellyes scyphozoïnes habitant des eaux chiliennes (Sielfeld, 2002). Cette espèce est distribuée dans tout l’océan Pacifique du sud de l’est de Paita au nord du Pérou à Punta Arenas du sud du Chili (leçon, 1830, Vanhoffen, 1888YKFE Kramp, 1961). Des quantités massives de méduses mortes ou de leurs vestiges ont été retrouvées ont été lavées à terre hors iquique, spécialement en été et faisant partie du printemps; Les nématocystes que les méduses utilisent pour l’alimentation et la défense sont l’une des causes les plus fréquentes d’irritations de la peau chez les nageurs (Vera et al, 2005). Cette espèce n’est pas toxique et des causes Ni modéré ni intoxication sévère chez l’homme, contrairement à la physiaphysaliste, une autre espèce rapportée dans les eaux chiliennes dont les toxines produisent de graves complications systémiques (Vera et al, 2005). Cependant, le venin légèrement toxique de C. La plocamie peut causer de légères manifestations cutanées et ophtalmologiques au cours des 24 premières heures et de réagir à long terme retardé chez les personnes qui ont été sensibilisées à travers des contacts antérieurs qui entraînent une réponse immunitaire (Vera et al, 2005 ).

Bien que fréquemment observé dans les zones côtières, il y a peu d’informations sur la biologie c. la biologie de la plocamie et encore moins sur ses nématocystes et la purification, la composition et les mécanismes d’action de son venin, comme c’est disponible pour D’autres espèces congénères telles que C. Quan-Quecirrha ou C. Achlyos (Long-Rowe & Burnett, 1994, Faisal et al, 1999, Takatochi et al, 2004). Par conséquent, nous avons effectué une caractérisation préliminaire qualitative pour mesurer l’activité biologique des extraits de nématocystes de 30 c. spécimens de plocamia collectés de Huayquique, Iquique, dans des sacs en plastique avec une plongée sous-marine à une profondeur maximale de 35 m en janvier et février 2007. Chaque spécimen A été identifié au niveau des espèces selon Kramp (1961) et Faicetti (1973) et le diamètre de la cloche externe a été mesuré.

Plus tard, en fonction de la technique modifiée de Burnett et al. (1992) et Burnett & Goldner (1970), les tentacules de méduses ont été extraites et trempées sur un filtre de 0,5 mm. L’extrait résultant a été réfrigéré dans des flacons marqués de 25 ml conservés dans des conteneurs jusqu’à leur analyse du laboratoire de base de l’Université Santo Tomás, Iquique Campus. Chaque échantillon a ensuite été centrifugé à 4 000 tr / min pendant 2 min dans une centrifugeuse d’Hettich (boeco-28, rotor 1624) dans un échantillon de 2: 3 ml: solution de saccharose saredrarée; La décomposition résultante a été réengurée pendant 1 min. L’échantillon a ensuite été soumis à une agitation magnétique froide (Scientifie VELP) pendant 15 à 20 minutes à 1200 tr / min jusqu’à l’obtention de l’extrait de nématocysté.Le rendement et l’ouverture d’extrait de nématocystes ont été estimés en comptant à 0,2 ml sous un microscope léger. Afin de caractériser qualitativement l’extrait nématocysté dans le saccharose en termes d’acides aminés et de peptides, un balayage UV de 250 à 700 nm a été effectué dans un spectrophotomètre Shimadzu UV-Vis 1240 à l’aide d’un blanc avec de l’eau distillée et une commande avec une solution de saccharose saturée et Un balayage IR de 700 à 4000 nm, avec une ébauche de saccharose avec de l’eau distillée. La présence de protéines a été confirmée qualitativement à l’extrait nématocystrique en le soumettant à un test de biuret.

Ensuite, l’activité biologique de l’extrait a été testée, évaluant l’activité de piégeage de radical libre à travers un dosage DPPH (diphényliquelydrazyle , Abuin et al., 2002) en triplica. Pour cela, 1 ml de l’extrait a été ajouté à 2 ml de solution DPPH (10 mg DPPH (99%) dans 1 L de méthanol, DPPH 10 mg-l-1), qui a ensuite été incubé dans un bain thermorégulable pendant 30 min. . Son absorbance a ensuite été lu à 517 nm en utilisant un blanc avec du méthanol. L’activité antioxydante de l’extrait a été calculée comme suit: A = 100 (échantillon de 1 ABS / référence ABS) (Burda et al, 2001). Cette activité a été comparée à BHT (hydroxytoluène butyylated), un antioxydant commercial fréquemment utilisé dans l’industrie alimentaire.

L’activité hémolitiques de l’extrait a également été prouvée à l’aide du test d’hémolyse avec des érythrocytes humains selon Zou et al. (2001) et Mayasuki et al. (1987). Pour cela, 5 ml de sang empruntés d’un jeune donateur en bonne santé qui se faisaient jeûner pendant 12 heures ont été placés dans un destinataire avec l’agent anti-coagulation EDTA. Le plasma a été éliminé en triplicate en centrifugant l’échantillon (3500 tr / min pendant 5 min) et la suspension érythrocyte a été lavée avec une solution saline physiologique (0,9%) pour éliminer le résidu de plasma. Enfin, 1 ml de la suspension d’origine (5 ml d’érythrocytes lavés blanchi à 250 ml avec une solution saline physiologique de 0,9%) a été ajoutée aux différents volumes de l’extrait jusqu’à atteindre 3 ml avec la solution saline physiologique. Ensuite, celles-ci ont été incubées à 37 ° C dans un bain thermorégulable pendant 2 h, centrifugé à 3500 tr / min pendant 5 min, et le surnageant a été quantifié à 541 nm.

Tous les échantillons échantillonnés étaient vivants et matures. Leurs diamètres de cloche ont fluctué entre 130 et 250 mm. Le rendement d’extrait de nématocystes par spécimen allait de 75 à 85%, tandis que le rendement de la rupture de nématocystes variait de 50 à 70% tous les 0,2 ml.

En ce qui concerne le spectre de la plage UV, un petit pic a été observé à 280 NM avec une gamme d’analytes absorbés entre 350 et 700 nm (Fig. 1). Les balayages IR des extraits ont révélé des signaux des bandes les plus « concentrées » de l’extrait dans le groupe 1 (2800-3000 nm), associée à des groupes O-méthylnions ou de groupes de formage d’aldéhyde; Groupe 2 (1500-1200 nm) liés aux obligations N02, 0-N02 et C-N02; Groupe 3 (1200-1000 nm) associé aux obligations C-O, C-OH et C-N, dans laquelle la plus probable est la liaison C-O, mais il existe des probabilités moyennes pour les obligations C-N; et le groupe 4 (1000-700 nm) liés aux liaisons C-O, O-O, N-O et N02, dans laquelle le plus probable est C-O (figure 2).

Le pourcentage d’activité de piégeage radical libre (Fig. 3) indiquait une activité antirraye de l’extrait nématocysté d’environ 65% par rapport à un antioxydant commercial utilisé dans l’industrie alimentaire (BHT), dont l’activité est beaucoup plus efficace ( 97%). D’autre part, l’extrait nématocysté a montré une faible activité hémolytique chez les érythrocytes humains (Fig. 4).

L’extrait a présenté une liaison CO dans ses structures qui auraient pu être un groupe aldéhyde ou carbonyle et une liaison CN, azote pouvant être associée à un groupe Nitro. Ces molécules (oxygénées et / ou atrogènes) donnent des résultats positifs dans le test buriet pour les protéines, correspondant au pic de 280 nm dans le balayage des UV. Cela suggère que les molécules de l’extrait pourraient être des acides aminés à partir de protéines. La présence d’une composante protéique est également observée chez les espèces avec un potentiel toxique plus élevé (Vera et al, 2004, 2005). D’autre part, la gamme d’analytes absorbés entre 350 et 700 nm suggère un effet de la concentration de saccharose étant donné la plus grande absorption de l’extrait.

étant donné l’activité antioxydante de l’extrait, on peut déduire que Cela serait probablement dû à la présence de protéines contenant des groupes aromatiques. La présence d’un composant protéique est également observée chez les espèces avec un potentiel toxique plus important (Vera et al, 2004).

L’activité hémolytique de la toxine a été prouvée dans d’autres espèces cogénères (C. Quinquecirrha et C. Achlyos) et il a été mortel et / ou très sensible chez les rats. Son potentiel a été jugé différent lors de la comparaison de la toxine chez les deux espèces, étant inférieure pour C. Achlyos (Long-Rowe & Burnett, 1994; Faisal et al, 1999).Cette espèce était également jugée mortelle dans d’autres tissus du diamant killifish (Adinia Xenica) (Takatochi et al, 2004). Toutefois, pour C. PLOCAMIA, les composants moléculaires testés dans l’extrait de nématocysté présentent une activité hémolytique faible et presque nulle. Par conséquent, nous pouvons conclure qu’ils ont une faible toxicité, du moins dans des érythrocytes humains. Cela pourrait généralement expliquer leur effet cutané et dermatologique réduit par rapport à d’autres espèces (Vera et al., 2005). En dépit de ces premiers résultats, il est nécessaire de réaliser de nouvelles études moléculaires afin de déterminer la structure des protéines présentes dans l’extrait de nématocysté, de tester l’hémo-lyse chez d’autres espèces et de déterminer les applications antioxydantes futures de l’extrait.

Remerciements

Les auteurs remercient la Dirección de Investigación Y Postgrado (Recherche et Post-troisième cycle) de l’Université Santo Tomás pour financer cette recherche.

Abuin, E. , E. Lissi, P. Ortiz & C. HENRIQUEZ. 2002. Réaction d’acide urique avec des radicaux DPPH à l’interface micellaire. Bol. SOC. Chil. Quím., 47 (2): 145-149.

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reçu: 10 juillet 2007; Accepté: 16 octobre 2007.

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